Development and applications of new analytical methodologies based on HPLC-ICP-MS for trace speciation analysis of selenium in biological samples

Sono stati sviluppati nuovi metodi per la determinazione delle seleno-proteine in plasma/siero umani mediante accoppiamento di sistemi miniaturizzati di HPLC di affinità e detector ORS-ICP-MS e ICP-SFMS. Un confronto interlaboratorio tra metodi ha consentito di stimare per la prima volta la concentrazione di riferimento di seleno-proteine nel siero umano commerciale BCR-637. Due metodi per la speciazione di seleno-proteine in plasma/siero sono stati applicati per investigare la loro distribuzione in pazienti affetto da diabete di tipo II e cancro colonrettale, in confronto a soggetti sani. Un nuovo metodo è stato poi sviluppato per la speciazione delle seleno-proteine in tessuti di colon di ratto, basati su HPLC bidimensionale accoppiata con ICP-QMS. Cinque specie del selenio sono state isolate, tra cui glutatione perossidasi 1 e 2, e tioredoxina reduttasi 1 sono state potenzialmente identificate mediante MALDI-TOF-MS. I metodo è stato trasferito a campioni umani ottenendo promettenti risultati preliminari.